檢測蛋白表達能有多快?10分鐘出結果![新品推薦]

【字體: 時間:2018年10月24日 來源:生物通

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  賽默飛世爾科技最新推出的Pro-Detect™快速檢測試紙僅需10-15分鐘,即可驗證蛋白是否表達,在表達和純化流程的關鍵環節隨時使用,讓您從此不再惴惴不安,而是對實驗結果胸有成竹。

在蛋白表達的漫長過程中,我們總是懷著忐忑不安的心情。特別是在表達全新蛋白或改變實驗體系后,這種緊張的感覺更加明顯。蛋白質看不見摸不著,不到最后,我們都無法獲知表達結果。在此過程中,除了轉發錦鯉,似乎什么也做不了。

然而,從轉化/轉染到表達再到檢測,大體需要好幾天的時間。若等到整個流程結束后再檢測蛋白是否表達,萬一結果不理想,那的確有點浪費時間。左一個三天,右一個五天,一晃整個月就過去了。如果有一種產品能夠快速測定蛋白表達,那該多好。

如今,這種產品真的上市了。賽默飛世爾科技最新推出的Pro-Detect™快速檢測試紙僅需10-15分鐘,即可驗證蛋白是否表達,在表達和純化流程的關鍵環節隨時使用,讓您從此不再惴惴不安,而是對實驗結果胸有成竹。

Pro-Detect快速檢測試紙是基于側向層析法,采用金偶聯捕獲抗體來檢測目標蛋白。使用方法相當簡單。您只需稀釋蛋白樣品,浸入試紙10到15分鐘,即可根據檢測線和對照線來判斷結果,無需任何特殊儀器。

與動輒耗費半天或一天的凝膠電泳及western blot相比,Pro-Detect的檢測時間大大縮短。不過,檢測結果卻與western blot和ELISA相當(圖1)。它能以細胞培養基、裂解液或純化蛋白為起始材料,對低至 ng/ml 水平的蛋白或抗體進行檢測。即使溶液中存在一些常見濃度的去垢劑或鹽離子,比如SDS和EDTA,結果也不受影響。實驗還表明,它不會與其他靶標發生交叉反應。

圖1:GST 蛋白檢測: Pro-Detect 快速 GST 檢測試紙與基于考馬斯染料 R-250 b的蛋白染色方法及基于化學發光的免疫印跡檢測比較。

既然快速又準確,那么我們不妨將Pro-Detect快速檢測試紙應用在蛋白表達和純化流程的關鍵環節,以便摸索蛋白表達的最佳條件。此外,Pro-Detect系列還有進行抗體分型的試紙。

蛋白表達

在蛋白表達和純化的過程中,人們一般是在表達完成或純化完成才檢測蛋白,畢竟western blot和跑膠都那么繁瑣,也不能馬上獲知結果。這樣做就有一個風險,如果不幸表達失敗,我們就浪費了3到6天的時間,拖延了實驗的進程。對于搶著出成果發文章的實驗室而言,這個代價可不小。

現在有了Pro-Detect快速檢測試紙,我們就可以實時監測蛋白表達和純化的各個階段。比如,在誘導前進行快速檢測,確認無內源性表達;或在誘導后進行監測,確定目標蛋白已開始表達;在純化階段,我們還可以快速檢測洗脫液,并收集含有目標蛋白的洗脫產物。

即使蛋白表達的結果不理想,在試紙上看不到任何陽性條帶,那么我們至少能及時止損,分析原因,優化條件,下次再戰,從而避免不必要的時間和成本損失。

目前,賽默飛提供14種標簽蛋白的檢測試紙,包括DYKDDDK(FLAG)-His雙標簽、SUMO、GST、MBP、Human Fc、Rabbit Fc、Mouse Fc、His、DYKDDDK (FLAG)、HA、Streptag II、AVI、Myc和V5。只要您的蛋白含有上述標簽,即可使用相應的試紙。

抗體分型

此外,針對 抗體研發和生產流程中的分型檢測,賽默飛還提供Pro-Detect抗體分型檢測試紙,能夠快速鑒定免疫球蛋白的類別、亞類以及單克隆抗體的輕鏈。與繁瑣費時的ELISA檢測(4-24小時)相比,檢測難度大大減小,只需10分鐘即可看結果。

除了小鼠和大鼠的抗體分型產品,賽默飛還獨家提供人源抗體的分型檢測產品。每份試紙都覆蓋了多種檢測指標,幫助您輕松實現各種抗體亞型和輕重鏈的快速鑒定。

小鼠

大鼠

IgG1, IgG2a, IgG2b, IgG3, IgA, IgM, κ輕鏈和λ輕鏈

IgG1, IgG2a, IgG2b IgG2c

IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA, IgM, κ輕鏈和λ輕鏈

使用方法

您的樣本可以是細胞培養基、裂解液或純化的蛋白。首先,您需要用試劑盒中提供的Pro-Detect稀釋緩沖液來稀釋樣本。然后,取適量樣本加入檢測管或96孔板。

之后,將Pro-Detect快速檢測試紙浸入稀釋的樣本中,孵育10-15分鐘。

最后觀察結果,就是這么簡單。

您瞧,1條試紙,10分鐘,就能夠讓您對蛋白表達和純化流程充滿信心,避免在整個流程結束后才追悔莫及。如果其中的某個環節不慎出錯,那么這條試紙至少能避免您一錯再錯。試紙雖小,作用可大呢。

不過還要提醒一下,這是一種快速的定性檢測,而非定量檢測,如果您需要判斷目的蛋白有多少,建議在表達和純化流程結束后,通過western blot等傳統實驗手段進一步分析。最后提一句,聽說這種試紙有新品嘗鮮活動,歡迎聯系賽默飛了解一下。(生物通 余亮)

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